□南宁市第二人民医院　罗艺兵

　　在临床检验中，真菌检测是诊断真菌感染性疾病的核心手段。真菌广泛存在于自然界，部分可作为条件致病菌，在人体免疫力下降时引发皮肤、黏膜乃至深部脏器感染，如念珠菌性阴道炎、曲霉菌性肺炎等。与细菌检测不同，真菌的形态结构与生长特性具有独特性，其检测流程需经过标本采集、显微镜检查、真菌培养、鉴定与药敏试验等环节。深入揭秘真菌检测流程，有助于患者理解检测必要性与配合要点，为临床精准诊疗提供可靠依据。

　　标本采集：精准取样是检测的首要前提。真菌检测的准确性，首先取决于标本采集的规范性。不同部位的真菌感染，需采用对应的取样方式，确保标本含足量真菌病原体，同时避免外界污染。皮肤黏膜真菌感染，如手足癣、甲癣、口腔念珠菌病，采集时需严格无菌操作：刮取皮损边缘鳞屑、病甲甲屑，或用无菌棉拭子擦拭口腔黏膜白斑处；女性生殖道念珠菌感染，需在阴道后穹窿采集分泌物。深部真菌感染，如肺部、血液、中枢神经系统感染，标本采集要求更严格：痰标本需清晨深部痰液，避免唾液混入；血液标本需在发热初期或高峰期静脉采血；脑脊液标本需腰椎穿刺采集。所有标本采集后需立即置于专用无菌容器，标注患者信息与标本类型，及时送检。无法及时送检的标本，需按真菌类型妥善保存，如深部真菌标本短期冷藏，皮肤鳞屑保持干燥，避免真菌死亡或形态改变影响结果。

　　显微镜检查：快速锁定真菌的"初筛利器"。显微镜检查是真菌检测的快速初筛环节，通过观察真菌的形态、结构与孢子特征，可在短时间内为临床提供初步诊断线索，操作简便、耗时短，是常用初筛手段。技术人员会根据标本类型采用不同制片与染色方法。皮肤鳞屑、甲屑等标本常用氢氧化钾涂片法，混合10%氢氧化钾溶液并加热溶解角质层，镜下可清晰观察菌丝与孢子；痰、脑脊液等液体标本采用革兰染色法，真菌表现为革兰阳性、圆形或椭圆形孢子，或分枝状菌丝；隐球菌等特殊真菌需墨汁负染色法，其荚膜在墨汁背景下呈现透亮圈，具有诊断特异性。显微镜检查可在30分钟内得出结果，适合急诊患者快速诊断，但存在局限性：真菌数量少的标本易假阴性，且无法准确鉴定种类，确诊仍需依靠后续培养与鉴定。

　　真菌培养：实现真菌精准鉴定的"金标准"。真菌培养是真菌检测的核心环节，也是目前鉴定真菌种类的“金标准”。通过人工培养分离纯化标本中的真菌，观察菌落形态、颜色与生长特性，结合生化试验，实现精准鉴定。真菌培养需专用培养基，常用沙堡弱培养基，适合大多数真菌生长；选择性培养则添加抗生素或放线菌酮，抑制细菌与污染真菌，提高目标真菌分离率。接种时将标本均匀涂布于培养基表面，置于25℃~37℃恒温培养箱培养。真菌生长速度远慢于细菌，普通念珠菌需24~48小时，皮肤癣菌、曲霉菌等需1~2周，部分深部真菌培养时间更长。培养中技术人员需每日观察，记录菌落形态、颜色、质地与边缘特征。待菌落生长至一定规模，挑取部分进行生化鉴定，最终确定真菌具体种类。

　　鉴定与药敏：指导临床精准用药的关键环节。完成真菌培养与初步鉴定后，需进一步菌种确认与药物敏感性试验，这是指导临床合理使用抗真菌药物的关键。不同真菌对药物敏感性差异显著，药敏结果可直接为用药提供依据，避免治疗失败或耐药性产生。真菌精准鉴定除传统形态学与生化试验外，现代检验科还采用PCR、基因测序等分子生物学技术，检测特异性基因片段，实现快速精准鉴定，尤其适合生长缓慢或形态不典型真菌。药物敏感性试验通常采用纸片扩散法或微量稀释法，观察不同浓度抗真菌药物对真菌的生长抑制情况，确定最低抑菌浓度，判断敏感程度。

　　检验医师会在报告中明确真菌种类与药物敏感性，临床医师结合患者病情与身体状况，选择合适药物与治疗方案，实现精准治疗。真菌检测流程环环相扣，显微镜检查快速初筛，培养与鉴定明确诊断，药敏试验保驾护航。检验科医生始终严谨工作，在微观世界探寻真菌“踪迹”，也希望通过科普让大众重视真菌感染早期筛查与诊断，筑牢健康防线。